紫外分光光度計原理

物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(cháng)的光能量，相應地發(fā)生了分子振動(dòng)能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會(huì )相同。因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線(xiàn)，可根據吸收光譜上的某些特征波長(cháng)處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結構和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
又因為許多物質(zhì)在紫外-可見(jiàn)光區有特征吸收峰，所以可用紫外分光光度法對這些物質(zhì)分別進(jìn)行測定（定量分析和定性分析）。紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律。
朗伯-比耳定律(Lambert－Beer)是光吸收的基本定律，俗稱(chēng)光吸收定律，是分光光度法定量分析的依據和基礎。當入射光波長(cháng)一定時(shí)，溶液的吸光度A是吸光物質(zhì)的濃度C及吸收介質(zhì)厚度l(吸收光程)的函數。
首先確定實(shí)驗條件，并在此條件下測得標準物質(zhì)的吸收峰以及其對應波長(cháng)值（同時(shí)可獲得該物質(zhì)的大吸收波長(cháng)）；再在選定的波長(cháng)范圍內（或大波長(cháng)值處），分別以（不同濃度）標準溶液的吸光度和溶液濃度為橫、縱坐標繪出化合物溶液的標準曲線(xiàn)得到其所對應的數學(xué)方程；接著(zhù)在相同實(shí)驗條件下配制待測溶液，測得待測溶液的吸光度，后用已獲得的標準曲線(xiàn)方程求出待測溶液中所需測定的化合物的含量。
凡具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結構的有機化合物，根據在特定吸收波長(cháng)處所測得的吸收度，可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測定。